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- 品牌：聯(lián)祖
- 產(chǎn)地：進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
- 貨號(hào)：LZR3510
- 價(jià)格： ￥3800/盒
- 發(fā)布日期： 2020-11-13
- 更新日期： 2025-03-21
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 聯(lián)祖 |
| 貨號(hào) | LZR3510 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
槍狀肝吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格 | Dicrocoelium dentriticum | LZR3510 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
預(yù)變性 | 94℃ | 5 min | 1 |
變性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
終延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為：待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
ChromohalobacterACE (Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit拉丁屬名: Chromohalobacter sp.
宓花豆根瘤菌FMOD (Fibromodulin) ELISA Kit用途: 固氮
塔賓曲霉NNE (Non-Neuronal Enolase) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus tubingensis
傘枝犁頭霉cADPRH/CD38 (Cyclic ADP Ribose Hydrolase) ELISA Kit拉丁屬名: Absidia corymbifera
柱形矛束霉ADM (Adrenomedullin) ELISA Kit拉丁屬名: Cephalotrichum columnare
水生拉恩氏菌NPHN (Nephrin) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
糞產(chǎn)堿桿菌AFGF/FGF1 (Acidic Fibroblast Growth Factor 1) ELISA Kit拉丁屬名: Alcaligenes faecalis
科氏芽孢桿菌（可訂購(gòu)）FGF21(Fibroblast Growth Factor 21) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus cohnii
樟疫霉FGF19 (Fibroblast Growth Factor 19) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
鏈格孢FGF23 (Fibroblast Growth Factor 23) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
冬蟲夏草（冬蟲夏草菌，蝙蝠蛾被毛孢，中國(guó)被毛孢）FGFR1 (Fibroblast Growth Factor Receptor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Ophiocordyceps sinensis
三葉草根瘤菌PEDF (Pigment Epithelium Derived Factor ) ELISA Kit 用途: 生物固氮
棘孢小單孢菌APLN (Apelin) ELISA Kit拉丁屬名: Micromonospora echinospora
楊生盤二孢CTSB (Cathepsin B) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或，非藥用，非食用
地衣芽孢桿菌IgG2a (Immunoglobulin G2a) ELISA Kit用途: 固氮。
槍狀肝吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格CrkRS/CRK7 細(xì)胞分裂周期2相關(guān)蛋白激酶7抗體鼠尾草酸Carnosic acid中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C20H28O4 分 子 量: 332.43
phospho-MCK10/CD167a/DDR1(Tyr513) 磷酸化神經(jīng)上皮酪氨酸激酶抗體（激酶10）白花前胡香豆精I(xiàn)(-)-visnadin化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C21H24O7 分 子 量: 388.411
Ret/HSCR1 原癌基因酪氨酸蛋白激酶受體RET/多發(fā)性腺瘤和甲狀腺髓樣癌蛋白抗體白蠟樹精Fraxinol 中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C11H10O5 分 子 量: 222.1941
phospho-Ret/HSCR1(Tyr1062) 磷酸化原癌基因酪氨酸蛋白激酶受體RET抗體蒼山香茶菜素Kaur-16-en-15-one,1,3,7,11-tetrakis(acetyloxy)-12-hydroxy-, (1a,3b,7b,11b,12a)- (9CI)對(duì)照藥材 分 子 式: C28H38O10 分 子 量:
LDHD 乳酸脫氫酶D抗體脫乙酰靈芝酸FDeacetyl ganoderic acid F中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: 分 子 量:
ENO1+ENO2+ENO3 神經(jīng)元，肌肉特異性烯醇化酶抗體水飛薊寧Silydianin中藥標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C25H22O10 分 子 量: 482.44
AKR1B10 醛糖還原酶相關(guān)蛋白質(zhì)抗體13-O-乙酰基馬桑寧3,6-Methano-2,4,7-trioxacyclopenta[cd]cycloprop[a]azulen-5(1H)-one,7b-(acetyloxy)octahydro-6a-hydroxy-7c-methyl-8-(1-methylethenyl)-, [2aS-(2aa,3a,6a,6aa,6bb,7ab,7ba,7ca,8S*)]- (9CI)對(duì)照藥材 分 子 式: C17H20O7 分 子 量:
