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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
布魯氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):LZR3363
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-11
  • 更新日期: 2025-05-19
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號(hào) LZR3363
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

客戶只需提供樣品和待檢測(cè)名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

布魯氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Brucella abortus

LZR3363

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;

(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。

其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

樟疫霉ANGPTL2 (Angiopoietin Like Protein 2) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

擬康寧木霉ANGPTL4 (Angiopoietin Like Protein 4) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

擬青霉ANG-R-Tie1 (Angiopoietin Receptor Tie1) ELISA Kit 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用

嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌ANG-R-Tie2 (Angiopoietin Receptor Tie2) ELISA Kit 拉丁屬名: Pseudomonas maltophilia

蓋氏海桿狀菌AGT (Angiotensinogen) ELISA Kit拉丁屬名: Marinobacter guineae

帚狀曲霉ANG1 (Angiopoietin 1) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus penicillioides

大腸埃希菌ANG2 (Angiopoietin 2) ELISA Kit拉丁屬名: coli

粘孢白僵菌ANXA5 (Annexin A5) ELISA Kit拉丁屬名: Beauveria velata

黃曲霉ANXA2(Annexin A2) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus flavus Link

棒形青霉α-Fodrin IgG/IgA (anti-alpha-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit拉丁屬名: Penicillium claviforme

枯草芽孢桿菌ACA-IgA (anti-Cardiolipin Antibody IgA) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus subtilis

地衣芽胞桿菌ACA-IgG (anti-Cardiolipin Antibody IgG) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus licheniformis

三線鐮孢ACA-IgM (anti-Cardiolipin Antibody IgM) ELISA Kit拉丁屬名: Fusarium tricinctum

爪哇根霉ACA (anti-Centrol and Centrosome Antibody) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhizopus javanicus Takada

巨大芽孢桿菌 AADH (Antidiuretic Hormone) ELISA Kit注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或,非藥用,非食用
布魯氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書CXCL16 peptide  CXC趨化因子16抗原HEPES溶液(1mol/L,pH6.8-8.0)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

Sema3A (semaphorin 3A)  臂板蛋白3A(多肽)白術(shù)內(nèi)酯IIIAtractylenolide III中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C15H20O3 分 子 量: 248.32

Sema3F (semaphorin 3F)  臂板蛋白3F抗原去乙?;鵒phiopojaponin A中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式:  分 子 量:

SFRP1(Secreted frizzled related protein 1)  分泌型卷曲相關(guān)蛋白1抗原6'-O-β-D-芹糖獐芽菜苷6'-O-beta-D-Apiofuranosylsweroside化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式:  分 子 量:

SGLT1(sodium-glucose cotransporter1)  鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1抗原氟羅沙星Fleroxacin化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品 分 子 式: C17H18N3O3F3 分 子 量: 369.33832

Shadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor)  新朊蛋白/朊蛋白相關(guān)蛋白/沙杜(Shadoo)蛋白抗原甲基赤芝萜酮methyl-對(duì)照藥材 分 子 式: C22H34N4O5S2Cl2 分 子 量: 569.56516

Shiga-like toxin IIe variant subunit A 0139[Escherichia coli 0139]  大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體(O139菌型)遠(yuǎn)志皂苷DOlean-12-en-28-oicacid, 3-(b-D-glucopyranosyloxy)-2,16,23-trihydroxy-,O-D-apio-b-D-furanosyl-(1®3)-O-b-D-xylopyranosyl-(1®4)-O-6-deoxy-a-L-mannopyranosyl-(1®2)-a-L-arabinopyranosyl ester, (2b,3b,4b,16a)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品  分 子 式: C57H92O27 分 子 量: 1209.32418

 


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