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上海聯(lián)祖生物科技有限公司
產(chǎn)品展廳
豬布魯氏桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
  • 品牌:聯(lián)祖
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:LZR3371
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-11
  • 更新日期: 2025-05-19
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 聯(lián)祖
貨號 LZR3371
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

PCR儀有無熱蓋,產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。

3:結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

豬布魯氏桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書

Brucella suis

LZR3371

PCR反應鑒定——PCR反應條件:

循環(huán)步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

預變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1


熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟:

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線;

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中步驟(1)為:將參照基因與待測目的基因片段等比例連接,克隆到同一個質粒載體上,構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品,并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域,其中所述質粒載體為本領域常規(guī)質粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題,提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為:待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后,目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù),計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結果。

其中所述待測目的基因為本領域常規(guī)待測目的基因,較佳地為或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴增為本領域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法,所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:

孔狀短小莖點霉CA1 (Carbonic Anhydrase I) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

枯草芽孢桿菌CA2 (Carbonic Anhydrase 2) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  subtilis

申氏不動桿菌*PICP (Procollagen I C-terminal Propeptide) ELISA Kit拉丁屬名: Acinetobacter schindleri

單色下皮黑孔菌CEA (Carcinoembryonic Antign) ELISA Kit 拉丁屬名: Cerrena unicolor

海欖雌小單孢菌PINP (Procollagen Type I N-Terminal Propeptide) ELISA Kit拉丁屬名: Micromonospora avicenniae

致密曲霉CLS (Cardiolipin Synthase) ELISA Kit 拉丁屬名: Aspergillus delicatus

植物乳桿菌CLCF1 (Cardiotrophin Like Cytokine Factor 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Lactobacillus  plantarum

云南紅球菌CT-1 (Cardiotrophln 1) ELISA Kit拉丁屬名: Rhodococcus yunnanensis

動球菌COMP (Cartilage Oligomeric Matrix Protein) ELISA Kit 拉丁屬名: Kineococcus sp.

新城疫病毒CASP3 (Caspase 3) ELISA Kit拉丁屬名: Newcastle       disease virus

嗜鹽堿球菌CASP4 (Caspase 4) ELISA Kit 拉丁屬名: Natronococcus  sp.

紫萁小菇CASP7 (Caspase 7) ELISA Kit 拉丁屬名: Mycena purpureofusca

彎孢菌CASP9 (Caspase 9) ELISA Kit用途: 研究

Curvularia  cocis Matsush. CASP10 (Caspase 10) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或,非藥用,非食用

謝瓦曲霉CASP11 (Caspase 11) ELISA Kit拉丁屬名: Aspergillus chevalieri
豬布魯氏桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書TIEG1/KLF10(TGF-beta inducible early response gene 1)  TGF-β誘導早期應答基因1抗原沙苑子苷AComplanatoside A中藥標準品  分 子 式: C28H32O16 分 子 量: 624.54408

TGF- BetaR1/ALK (TGF-beta receptor type I)  轉移生長因子–β受體1抗原鹽酸強力霉素Doxycycline hyclate化學標準品 分 子 式: C22H24N2O8.HCl 分 子 量: 480.90

Erdj5/DNAJC10  Erdj5/DNAJC10多肽磷酸緩沖鹽粉劑(1×PBS,無鈣鎂)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

Tie1/JTK14 peptide  上皮生長因子樣域酪氨酸激酶1抗原巴卡亭IIIBaccatine III中藥標準品  分 子 式: C31H38O11 分 子 量: 586.62682

Tie2(Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2)  上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2抗原蠟果楊梅酸 BOlean-12-en-28-oic acid,27-[[(2E)-3-(3,4-dihydroxyphenyl)-1- oxo-2-propenyl]oxy]-3-hydroxy-,(3a)- 對照藥材 分 子 式: C39H54O7 分 子 量: 634.84186

Rarres2/TIG2/Chemerin(Retinoic acid receptor responder protein 2)  視黃酸受體應答蛋白2抗原波棱酮Herpetone化學標準品 分 子 式: C29H30O9 分 子 量: 522.5431

TLR3 (Toll-like receptor 3)  Toll樣受體3抗原西紅花苷Crocin中藥標準品  分 子 式: C44H64O24 分 子 量: 976.96


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