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客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實驗報告給您。

PCR實驗方法步驟：

方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，產(chǎn)品僅用于科研不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

熒光定量PCR檢測方法包括以下步驟：

(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；

(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。

其中所述參照基因為本領(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。步驟(2)為：待測樣本與步(1)所述標準品經(jīng)同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數(shù)，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。

其中所述待測目的基因為本領(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
以下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品：

金龜子綠僵菌BMP-3 (Bone Morphogenetic Protein 3) ELISA Kit 拉丁屬名: Metarhizium anisopliae

牛型放線菌CAPS (Calcyphosine) ELISA Kit拉丁屬名: Actinomyces bovis

假桄榔葉點霉FABP4 (Fatty Acid Binding Protein 4, Adipocyte) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

厚壁芽孢桿菌AFP-L3 (Alpha-Fetoprotein Lens Culinaris Agglutinin 3) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus pycnus

蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種FUCA (Alpha-L-Fucosidase, Tissue) ELISA Kit拉丁屬名: Bacillus  thuringiensis

哈茨木霉CCNB (Cyclin-B) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

釀酒酵母AGC (Aggrecan) ELISA Kit拉丁屬名: Saccharomyces  cerevisiae

豌豆根瘤菌AGER (Advanced Glycosylation End Product Specific Receptor) ELISA Kit用途: 共生固氮

斑玉蕈CD3d (Cluster of Differentiation 3d) ELISA Kit 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

地霉半乳糖酵母AGR2 (Anterior Gradient Protein 2) ELISA Kit拉丁屬名: Galactomyces geotrichum

粘著劍菌AGRN (Agrin) ELISA Kit用途: 固氮

Acinetobacter genospeciesAGT (Angiotensinogen) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

膠孢AIF1 (Allograft Inflammatory Factor 1) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用

紅球菌AIG1 (Androgen Induced Protein 1) ELISA Kit 拉丁屬名: Rhodococcus  sp.

松針散斑殼ALCAM (Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或，非藥用，非食用
白樂杰馬杜拉放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒規(guī)格Annexin Ⅲ peptide  膜粘連蛋白A3抗體乙醇溶液(75%,RNase free)標準滴定溶液 分 子 式:  分 子 量:

TIMP-2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2)  金屬蛋白酶組織抑制因子-2(抗原)草質(zhì)素4H-1-Benzopyran-4-one,3,5,7,8-tetrahydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-中藥標準品  分 子 式: C15H10O7 分 子 量: 302.2357

TIMP-3(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-3)  金屬蛋白酶組織抑制因子(抗原)麥冬皂苷DOphiopogonin D中藥標準品  分 子 式:  分 子 量:

Proinsulin  原異東莨菪內(nèi)酯6-Hydroxy-7-methoxy-2H-chromen-2-one中藥標準品  分 子 式: C10H8O4 分 子 量: 192.16812

ADM R, Adrenomedullin receptor  腎上腺髓質(zhì)素受體（抗原）酸棗仁皂苷B1Jujuboside B1中藥標準品  分 子 式: C52H84O21 分 子 量: 1045.21

PAI-1  纖溶酶原激活物抑制因子七葉皂苷鈉Escin, monosodium salt中藥標準品  分 子 式:  分 子 量:

CK7  細胞角蛋白7黏黴酮Glutinone (triterpene)對照藥材 分 子 式: C30H48O 分 子 量: 424.70152